.jpg)
Antinukleární protilátky jsou součástí komplexního diagnostického procesu systémových onemocnění pojivové tkáně. Složitý mechanismus tvorby antinukleárních protilátek ztěžuje interpretaci jejich výsledků a přítomnost nebo nepřítomnost jednotlivých protilátek nemusí vždy znamenat chorobný proces. Jaké jsou typy antinukleárních protilátek? Kdy by měl být test proveden?
Obsah:
- Antinukleární protilátky - typy
- Antinukleární protilátky - tvorba a mechanismus účinku
- Antinukleární protilátky - indikace pro studii
- Antinukleární protilátky - jaký je test?
- Antinukleární protilátky - jak interpretovat výsledek?
Anti-nukleární protilátky (ANA) jsou autoprotilátky namířené proti prvkům buněčného jádra, např. DNA a cytoplazmě. Jsou jednou z nejrozmanitějších a nejvíce studovaných protilátek.
Antinukleární protilátky - typy
- protilátky proti extrahovatelným jaderným antigenům (anti-ENA):
- proti DNA topoizomeráze I (anti-Scl70)
- proti ribonukleoproteinu (anti-RNP)
- proti antigenu Smith (anti-Sm)
- anti-Mi2 / Mi-2
- anti-Ro (SS-A)
- anti-La
- anti-Jo1
- anti-PM-Scl
- anti-Kn
- protilátky proti jadernému proteinu tvořícímu póry gp-2010 (anti-gp-210)
- protilátky proti nativní dvouvláknové DNA (anti-dsDNA)
- anti-centromerické protilátky (anti-ACA)
Antinukleární protilátky - tvorba a mechanismus účinku
Autoimunita je abnormální reakce imunitního systému proti jeho vlastním tkáním, která vede k výskytu autoimunitních onemocnění.
Byly popsány různé mechanismy autoimunity, jedním z nich je uvolňování antigenů skrytých před imunitním systémem, například v důsledku zánětlivého poškození tkáně.
Poté se uvolní prvky nalezené v buněčném jádru, např. DNA, RNA, histony, které imunitní systém začne rozpoznávat jako něco cizího a vytváří proti nim protijaderné protilátky.
Antinukleární protilátky - indikace pro studii
- podezření na onemocnění pojivové tkáně:
- systémový lupus erythematodes (přítomnost protilátek u 95–100% pacientů; protilátky proti dsDNA jsou specifickým markerem onemocnění)
- lupus vyvolaný léky (95-100% pacientů)
- antifosfolipidový syndrom (40-50% pacientů)
- systémová sklerodermie (80-95% pacientů, zejména protilátky anti-Scl70)
- polymyositida a dermatomyositida (40-80% pacientů, zejména protilátky anti-Jo1 a anti-Mi2)
- Sjögrenův syndrom (48-96% pacientů, zejména anti-Ro a anti-La protilátky)
- revmatoidní artritida (asi 10% pacientů)
- juvenilní idiopatická artritida (méně než 10% pacientů)
- Raynaudův syndrom (20–60% pacientů)
- fibromyalgie (15-25% pacientů)
- smíšená onemocnění pojivové tkáně (95-100% pacientů)
- hodnocení aktivity nemoci a monitorování účinnosti léčby, např. anti-dsDNA protilátky u systémového lupus erythematodes
- korelace přítomnosti protilátek s výskytem specifických symptomů onemocnění, např. Sjögrenův syndrom a přítomnost protilátek anti-Ro a anti-La
- předpovídání nemoci v budoucnosti
Antinukleární protilátky - jaký je test?
Krev se odebírá z ohybu lokte na lačný žaludek a používá se ke stanovení antinukleárních protilátek.
Metody pro stanovení protilátek jsou velmi odlišné a závisí na typu měřené antinukleární protilátky. Jedná se hlavně o imunologické metody, jako jsou:
- ELISA
- RIA
- nepřímá imunofluorescence
- metoda dvojité imunodifúze
- western blot
V případě antinukleárních protilátek se používá dvoustupňová diagnostika. Nejprve se provede screeningový test pomocí metody nepřímé imunofluorescence, která se vyznačuje vysokou citlivostí.
Metoda nepřímé imunofluorescence spočívá v imobilizaci buněk HEp-2 odvozených z lidských epiteliálních buněk na mikroskopickém sklíčku.
Buňky této linie mají ve své cytoplazmě a buněčných jádrech antigeny, které vážou patologické protilátky z krve pacienta.
Po přidání séra pacienta do sklenice se antinukleární protilátky vážou na specifické antigeny a jsou viditelné pod mikroskopem díky speciálním fluorescenčním značkám.
Výhodou nepřímé imunofluorescence je možnost diferenciace typů protilátek na základě typu osvětlení fluorescenčního barviva.
Například záře jádra homogenního typu indikuje přítomnost anti-dsDNA nebo anti-ssDNA protilátek.
Pozitivní výsledek screeningového testu musí být vždy potvrzen. Za tímto účelem se používají velmi specifické imunologické metody, např. Western blot. Po detekci přítomnosti a identifikaci typu antinukleární protilátky se stanoví její titr, tj. Nejvyšší ředění séra, ve kterém lze detekovat přítomnost protilátek.
Antinukleární protilátky - jak interpretovat výsledek?
Správný titr antinukleárních protilátek by měl být pod 1:40.
Pokud je screeningový test na antinukleární protilátky negativní a neexistují žádné klinické příznaky naznačující systémové onemocnění pojivové tkáně, diagnóza by neměla být rozšířena o specifické protilátky, např. Anti-dsDNA, anti-Sm.
Za klinicky relevantní titry se považují ≥ 1: 160 u dospělých a ≥ 1:40 u dětí.
V případě pozitivních výsledků se navrhuje interpretovat výsledek testu následovně:
- titr 1: 40-1: 80 - hraniční výsledek (slabě pozitivní), při absenci klinických příznaků onemocnění pojivové tkáně se nedoporučuje test opakovat ani provádět následný test, protože výsledky se u většiny lidí v průběhu let nemění
- titr 1: 160-1: 640 - středně pozitivní výsledek, při absenci klinických příznaků onemocnění pojivové tkáně se doporučuje test opakovat po 6 měsících
- titr ≥ 1: 1280 - vysoký pozitivní výsledek, za přítomnosti klinických příznaků onemocnění pojivové tkáně je k diagnostice onemocnění nutná další odborná diagnostika
Je třeba mít na paměti, že sérologické testování antinukleárních protilátek je součástí komplexního diagnostického procesu a pozitivní výsledek musí být vždy interpretován v kontextu klinického obrazu a přítomnosti charakteristických příznaků onemocnění.
Antinukleární protilátky s nízkým titrem jsou přítomny u 5% zdravé populace a jejich frekvence s věkem stoupá.
Kromě toho se jejich přítomnost vyskytuje ve fyziologických a patofyziologických podmínkách, ve kterých antinukleární protilátky nemají žádný diagnostický význam:
- infekce, např. tuberkulóza, syfilis, malárie
- onemocnění jater, např. cirhóza jater
- plicní onemocnění, např. sarkoidóza, azbestóza
- rakoviny, např. leukémie, lymfom, rakovina prsu, melanom
- kožní onemocnění, např. psoriáza, lichen planus
- po transplantaci orgánu, např. transplantaci srdce, transplantaci ledviny
- užívání léků, např. antiepileptik, hydralazinu, solí lithia,
- další autoimunitní onemocnění, např. Hashimotova choroba, Addisonova choroba, diabetes typu I
- těhotenství (až 20% těhotných žen)
Etnická variace charakterizuje vznik různých typů antinukleárních protilátek.
Například bělošští pacienti se systémovou sklerózou mají větší pravděpodobnost anti-ACA protilátek a afroameričané a Afričané mají větší pravděpodobnost, že budou mít protilátky reagující na topoizomerázu.
Doporučený článek:
Diagnostický test ANA (antinukleární protilátky)Literatura
- Fischer K. a kol. Autoprotilátky v revmatologické praxi. Fórum Reumatol. 2016, 2, 1, 39–50.
- Vnitřní nemoci, editoval Szczeklik A., Medycyna Praktyczna Kraków 2010
- Laboratorní diagnostika s prvky klinické biochemie. Příručka pro studenty medicíny vydaná autory Dembińska-Kieć A. a Naskalski J.W., Elsevier Urban & Partner Wydawnictwo Wrocław 2009, 3. vydání
_1.jpg)
Přečtěte si více článků od tohoto autora
