Test transformace lymfocytů (LTT)

Test transformace lymfocytů (LTT) byl vyvinut v šedesátých letech minulého století a používá se především v alergologické diagnostice. Test LTT byl také použit při diagnostice chronických infekcí Borrelia burgdorferi, které jsou příčinou lymské boreliózy. Test je obzvláště důležitý, pokud se vyskytnou potíže s diagnostikováním onemocnění. Co je to test LTT a jak interpretovat jeho výsledky?

Obsah:

1. Aplikace testu transformace lymfocytů (LTT)
2. Test transformace lymfocytů (LTT) - lymská borelióza
3. Test transformace lymfocytů (LTT) - co to je?
4. Test transformace lymfocytů (LTT) - výsledky

Test transformace lymfocytů (LTT) byl poprvé popsán v roce 1960.

Test se v současné době používá ve výzkumu a jako diagnostický nástroj v různých oblastech medicíny, zejména v alergologii.

Aplikace testu transformace lymfocytů (LTT)

Test LTT byl použit v:

• hodnocení vad imunitního systému, např. projevujících se zvýšenou náchylností k infekcím
• diagnostika chronických bakteriálních (Borrelia, Chlamydia, Yersinia), protozoálních (Giardia lamblia) a virových (herpes virus) infekcí
• diagnostika hypersenzitivity (alergie) typu IV závislá na T lymfocytech na léky, kovy, přísady do potravin, plísně, potraviny (např. lepek); Test LTT se používá zejména při detekci alergií na dentální materiály, jako jsou zubní protézy a výplně

Test transformace lymfocytů (LTT) - lymská borelióza

Diagnostické obtíže související s diagnostikou lymské boreliózy nutí specialisty hledat jiné než doporučené laboratorní testy. Jedním z nich je test LTT. Předpokládá se, že test LTT může být užitečný při:

• potvrzení aktivní infekce u lidí s pozitivními sérologickými testy, ale bez příznaků svědících o lymské borelióze
• potvrzení aktivní infekce u jedinců s negativními nebo hraničními sérologickými testy, ale s klinickými příznaky lymské boreliózy
• sledování účinnosti antibiotické terapie
• hodnocení recidivy lymské boreliózy

Je však třeba mít na paměti, že test LTT není doporučeným testem v diagnostice lymské boreliózy provedenou Národní komorou laboratorních diagnostiků, Národním ústavem veřejného zdraví a národním konzultantem v oblasti infekčních nemocí, protože tento test v tomto případě stále vyžaduje validaci (tj. Potvrzení jeho důvěryhodnosti). entita nemoci.

• Lymská borelióza - výzkum boreliózy. Má test klíště smysl?

Přečtěte si také: Test ELISA - co detekuje? Jak číst výsledky? Cena testu Western Blot a lymské boreliózy. Interpretace výsledků testu PCR (testování) - aplikace. Co je technika PCR?

Test transformace lymfocytů (LTT) - co to je?

Test spočívá v hodnocení reaktivity buněk imunitního systému (T buněk imunitní paměti) na testovaný antigen / alergen, např. Léčivo, bakteriální protein. Imunitní buňky reagují na daný antigen / alergen po předchozím kontaktu s ním (odtud termín imunitní paměť T buňky).

Pro test LTT se buňky získávají z periferní krve pacienta odebrané z žíly. Poté se v laboratoři oddělí od krve jednotlivé buněčné frakce, konkrétně mononukleární buňky (lymfocyty a monocyty).

Izolované buňky se poté pěstují za vhodných podmínek a poté se stimulují specifickým antigenem / alergenem. Pokud s ním buňky byly v kontaktu, začaly se dělit a poté se měřila intenzita těchto dělení.

Jednotlivé úpravy testu LTT měří koncový bod buněčného dělení odlišně a lze je vyhodnotit nepřímo měřením:

• produkce signálních molekul, jako je interferon-gama (INF-γ), které jsou produkovány dělením buněk; jiný název pro tuto úpravu testu LTT je EliSpot
• aktivita receptoru na povrchu dělících se buněk, např. CD25, CD69, HLA-DR
• množství DNA vytvořené během fáze syntézy, které se nachází pouze v antigenu / alergenu stimulovaných, dělících se T buňkách; za tímto účelem jsou nově syntetizované řetězce DNA značeny např. 3H-thymidinem, který je poté detekován speciálním čítačem

Test se provádí ve třech nebo čtyřech opakováních, aby se zvýšila spolehlivost získaného výsledku.

Stojí za to vědět

Test LTT je velmi náročný laboratorní test. Vyžaduje drahé a moderní laboratorní vybavení a zkušenosti pracovníků provádějících zkoušku.

Z tohoto důvodu by měl být test prováděn pouze v centrech, které mají zkušenosti s prováděním testu LTT.

Test transformace lymfocytů (LTT) - výsledky

Pozitivní výsledek testu LTT naznačuje přítomnost T lymfocytů imunitní paměti v krvi, které byly dříve v kontaktu s testovaným antigenem / alergenem. Což může naznačovat kauzální vztah mezi studovaným faktorem a pacientovými příznaky.

Výsledek testu zahrnuje číselné hodnoty vyjádřené jako index stimulace (SI). SI vyjadřuje intenzitu dělení imunitních buněk ve srovnání s negativní kontrolou, což jsou v tomto případě imunitní buňky, které nebyly stimulovány antigenem / alergenem.

Skóre SI pod 1 je považováno za negativní, skóre mezi 2 a 3 je slabě pozitivní (hraniční) a skóre nad 3 je považováno za pozitivní.

Důležité

Jaké faktory mohou ovlivnit výsledek LTT?

Užívání léků, které potlačují aktivitu imunitního systému, např. Steroidy (methotrexát, prednison), může snížit schopnost buněk dělit se na buněčnou kulturu a / nebo produkci cytokinů buňkami.

Literatura

1. https://www.xenodiagnostics.com/lymphocyte-transformation-test.html
2. Pichler W.J a Tilch J. Test transformace lymfocytů v diagnostice přecitlivělosti na léky. Alergie. Srpen 2004; 59 (8): 809-20.
3. Rychlik U. et al. Laboratorní diagnostika testu transformace lymfocytů (LTT). Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425-428.
4. Laboratorní diagnostika chorob přenášených klíšťaty. Doporučení pracovní skupiny: Národní komora laboratorních diagnostiků, Národní ústav veřejného zdraví - Národní ústav hygieny, Národní konzultant v oblasti infekčních nemocí, Ústav infekčních nemocí a neuroinfekcí, Lékařská univerzita v Białystoku, Polská virologická společnost, Varšava 2014.

Karolina Karabin, MD, PhD, molekulární biolog, laboratorní diagnostik, Cambridge Diagnostics Polska Biolog se specializací na mikrobiologii a laboratorní diagnostik s více než 10 lety zkušeností v laboratorní práci. Absolvent Fakulty molekulární medicíny a člen Polské společnosti pro lidskou genetiku, vedoucí výzkumných grantů v Laboratoři molekulární diagnostiky na Ústavu hematologie, onkologie a interních chorob Lékařské univerzity ve Varšavě. Na 1. lékařské fakultě Varšavské lékařské univerzity obhájila titul doktora lékařských věd v oboru lékařské biologie. Autor mnoha vědeckých a populárně-vědeckých prací v oblasti laboratorní diagnostiky, molekulární biologie a výživy. Denně jako specialista v oblasti laboratorní diagnostiky vede věcné oddělení v Cambridge Diagnostics Polska a spolupracuje s týmem dietologů na CD Dietary Clinic. Své praktické poznatky z diagnostiky a dietoterapie nemocí sdílí s odborníky na konferencích, školeních a v časopisech a na webových stránkách. Zvláště se zajímá o vliv moderního životního stylu na molekulární procesy v těle.