Test antinukleárních protilátek (ANA) se používá jako primární test k hodnocení stavu pacientů s autoimunitními poruchami pojivové tkáně. Jedná se o poruchy, které ovlivňují mnoho tkání a orgánů v celém těle. Co ukazují výsledky testů? Co jsou ANA? Jaké nemoci lze detekovat ANA?
Obsah:
- Test ANA - co jsou antinukleární protilátky?
- Test ANA - použití v diagnostice
- Test ANA - přítomnost ANA v krvi zdravých lidí
- Test ANA - jak se jmenuje?
- Test ANA - kdy by měl být proveden test ANA?
Zkratka ANA pochází z anglického názvu anti-nukleární protilátky, což se do polštiny překládá jako „antinukleární protilátky“. Tyto molekuly patří k proteinům zvaným autoprotilátky, což jsou proteiny, které útočí na tělo, které je produkuje.
Test ANA - co jsou antinukleární protilátky?
Lidské tělo má mnoho obranných mechanismů proti patogenům. Jedním z nich je humorální imunita. Je založen na produkci ochranných protilátek. U zdravých lidí imunitní systém produkuje protilátky proti cizím antigenům.
Někdy však existují situace, kdy se produkují autoantigeny, které jsou namířeny proti proteinům v našem vlastním těle. Tento proces je nezbytný pro vznik autoimunitních onemocnění.
Antinukleární protilátky útočí na proteiny a další molekuly, které tvoří jádro.
Existuje mnoho různých typů ANA. Rozklad těchto protilátek je založen na typech jaderných složek, proti kterým jsou tyto molekuly namířeny. V závislosti na typu se ANA mohou vázat jak na jednotlivé proteiny, tak na komplexní komplexy.
Například existují protilátky proti jaderným kanálům a histonům, tj. Molekulám, na kterých je navinuta DNA.
Lze rozlišit útočící ANA:
- DNA
- histony
- ribonukleoproteiny
- Nukleární RNA
- nonhistonové proteiny
Všechny uvedené komponenty jsou charakteristické pro buněčné jádro.
ANA jsou přítomny v krvi během všech druhů nemocí. To zahrnuje autoimunitní poruchy, rakovinu a některé typy infekcí. To umožňuje použití antinukleárních protilátek při diagnostice určitých chorobných stavů.
Test ANA - použití v diagnostice
Test ANA se používá k detekci antinukleárních autoprotilátek v krvi pacienta. Toto vyšetření je důležité pro diagnostiku onemocnění, jako jsou:
- systémový lupus erythematodes
- Sjögrenův syndrom
- sklerodermie
- polymyositida
- dermatomyozitida
- autoimunitní hepatitida
- válcování vyvolané drogovou reakcí
Pozitivní výsledek testu ANA je diagnostický, pouze pokud to klinické příznaky potvrdí. Testování antinukleárních protilátek může být také užitečné pro sledování progrese onemocnění.
Typické testy používané k detekci a hodnocení ANA jsou:
- nepřímá imunofluorescence
- ELISA - enzymový imunosorbentní test
Metoda nepřímé imunofluorescence
Nepřímá imunofluorescence je jedním z nejčastěji používaných testů ANA. Tento test obvykle používá buňky Hep-2. Nanášejí se ve formě tenké vrstvy na podložní sklíčka mikroskopu. Poté se na ně umístí sérum odebrané od pacienta a inkubuje se společně s buňkami Hep-2.
Pokud jsou ANA přítomny ve odebraném vzorku, jsou detekovány po inkubační době ve formě spojené s antigeny v buněčném jádru. To lze vidět přidáním fluorescenční značky, která se váže na protilátky.
Nejčastěji se pro tento účel používá fluorescein nebo rhodopsin B isothiokyanát (FITC) nebo rhodopsin B. Molekula fluoreskuje, když je mu vystaven paprsek světla specifické vlnové délky. K pozorování a hodnocení fluorescence se používá mikroskop.
V buňkách HEp-2 lze pozorovat různé vzory fluorescence v závislosti na typu protilátky přítomné v lidském séru a lokalizaci antigenu. Jejich analýza umožňuje určit typy protilátek přítomných ve vzorku.
Hladiny protilátek se určují sériovým ředěním krevního séra. Test ANA je považován za pozitivní, pokud je pozorována fluorescence při titru 1: 40/1: 80. Výsledek nad 1: 160 má však významný diagnostický význam.
Enzymová imunotest (ELISA)
Enzymová imunotest (ELISA) používá k detekci ANA mikrotitrační destičky s antigeny. Každá jamka destičky je potažena jedním nebo více antigeny. To slouží k detekci specifických protilátek.
Krevní sérum se inkubuje v jamkách destičky a poté se vymyje. Pokud byly ve vzorku přítomny antinukleární protilátky, zůstanou po promytí navázány na příslušné antigeny na mikrotitrační destičce.
V dalším kroku testu se do jamky destičky přidá druhá protilátka vázaná na enzym. Enzymatická reakce způsobí změnu barvy roztoku.
Barevný rozdíl je úměrný množství protilátek vázaných na antigen v jamce destičky. Barva získaného roztoku může být hodnocena spektrofotometrickou metodou, tj. Měřením intenzity světelného paprsku procházejícího roztokem.
Test ANA - přítomnost ANA v krvi zdravých lidí
Odhaduje se, že u 5% lidské populace jsou antinukleární protilátky přítomny v krvi v koncentraci považované za diagnosticky relevantní, bez ohledu na přítomnost chorobného stavu.
Vzhledem k tomu, že frekvence ANA stoupá s věkem, má až 10–37% zdravých lidí ve věku nad 65 let pozitivní test na přítomnost ANA. Takové případy jsou častější u žen než u mužů.
Test ANA - jak se jmenuje?
Charakteristickou hodnotou pro test ANA je titr. Udává stupeň ředění séra, při kterém jsou antinukleární protilátky nedetekovatelné. Čím vyšší je koncentrace ANA v krvi, tím vyšší je titr přítomný ve výsledcích testu.
Pokud je titr vyšší než 1: 160, doporučuje se test specificity antinukleárních protilátek. Tyto další testy by měly být prováděny ve spojení s analýzou klinické anamnézy pacienta a fyzickým vyšetřením. Účelem těchto kroků je diagnostikovat nebo vyloučit autoimunitní poruchy.
Je však třeba poznamenat, že k tomuto výsledku dochází u 5% pacientů bez ohledu na stav onemocnění. Výsledek testu je diagnostický, pouze pokud existují další příznaky onemocnění.
Negativní výsledek testu ANA naznačuje, že je nepravděpodobné, že by pacient měl lupus nebo jiné autoimunitní onemocnění.
Test ANA - kdy by měl být proveden test ANA?
Test ANA je nařízen, když příznaky pacienta naznačují systémovou autoimunitní poruchu. Mohou být velmi zjevné a nespecifické a mohou se časem měnit.
Mezi příznaky patří:
- Nízká horečka
- Trvalá únava
- Bolest podobná artritidě
- Červená vyrážka
- Citlivost kůže na světlo
- Ztráta vlasů
- Bolest ve svalech
- Necitlivost nebo brnění v rukou nebo nohou
- Zánět orgánů a tkání (ledviny, plíce, srdce, výstelka srdce, centrální nervový systém nebo krevní cévy)
Literatura:
- https://labtestsonline.org/tests/antinuclear-antibody-ana
- "Lékařské předměty". Národní lékařská knihovna. 12. února 2013.
- „Test protijaderných protilátek: co to znamená“. Lupus Foundation of America. Vyvolány 7 June 2013
- Kumar, Y; Bhatia, A; Minz, RW (2. ledna 2009). „Antinukleární protilátky a jejich detekční metody v diagnostice onemocnění pojivové tkáně: cesta znovu navštívena“. Diagnostická patologie
- www.autopróbciala.info
- Kavanaugh, Arthur, Tomar, Russell, Reveille, John, Solomon, Daniel H. a další. Pokyny pro klinické použití testu na antinukleární protilátky a testy specifických autoprotilátek proti jaderným antigenům. Archivy patologie a laboratorní medicíny. 124 (1), s. 71-81, leden 2000
Přečtěte si více od tohoto autora